定量（Absolute Quantification，AQ）

分析用于確定未知樣本中某個(gè)核酸序列的量值，即通常所說(shuō)的拷貝數(shù)，應(yīng)用與病原體檢測(cè)，轉(zhuǎn)基因食品檢測(cè)，及基因表達(dá)研究。

SYBR Green特性：

（1）只有和雙鏈DNA結(jié)合后才發(fā)熒光。

（2）變性時(shí)，DNA雙鏈分開(kāi)，無(wú)熒光。

（3）在延伸結(jié)束階段采集熒光信號(hào)。

（4）SYBR Green也能和非特異性的雙鏈DNA結(jié)合發(fā)光，所以必須在反應(yīng)結(jié)束時(shí)做熔解曲線分析。 

TaqMan探針的特性：

（1）5′端標(biāo)記有報(bào)告基團(tuán)（Reporter, R），如FAM、VIC等 

（2）3′端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán) （Quencher, Q）

（3）探針完整，R所發(fā)射的熒光能量被Q基團(tuán)吸收 ，無(wú)熒光， R與Q分開(kāi)，發(fā)熒光（4）Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性，可水解探針。

定量的標(biāo)準(zhǔn)樣品：

（1）含有和待測(cè)樣品相同擴(kuò)增片段的克隆質(zhì)粒

（2）含有和待測(cè)樣品相同擴(kuò)增片段的cDNA

（3）PCR的產(chǎn)物，可分別做系列稀釋。

服務(wù)流程：

注意：客戶可根據(jù)所能提供的起始材料不同，選擇從步驟1或2啟動(dòng)項(xiàng)目。